您好!欢迎访问铭修(上海)生物科技有限公司网站!
全国服务咨询热线:

18930233920

当前位置:首页 > 技术文章 > DIGITONIN细胞质膜通透处理液产品说明书中文版

DIGITONIN细胞质膜通透处理液产品说明书中文版

更新时间:2023-10-24  |  点击率:328

MX12860 v.A

 

   DIGITONIN细胞质膜通透处理液产品说明书 

 

主要用途

 

   DIGITONIN细胞质膜通透处理液是一种旨在通过温和离子性去垢剂处理,形成膜孔,获得通透的常用技术方法。方法经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种免疫检测、蛋白和分子转运等的前处理。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,效果明显

 

技术背景

细胞质膜通透技术(plasma membrane permeabilization technique )是一种使各种类型细胞的质膜形成孔隙,从而获得外源性分子进入细胞内部,以控制细胞内的生理活动的实验技术。通常的通透方法包括电击通透(electropermeabilization)、去垢剂通透、膜穿孔毒素(pore forming toxin)通透等。其中毛地黄皂苷(digitonin)是一种螺甾烷皂苷(SpirostanSaponin),分子式C56H92O29 温和的非离子甾类糖苷(steroid glycoside)去垢剂,常用于膜蛋白或受体溶解、线粒体分离、胆固醇定量,以及质膜通透。细胞通透后,形成较大的膜孔,允许较大的分子,例如酶、抗体等导入进细胞内。用于各种检测,包括免疫检测酶活检测等

产品内容

 

  清理液(Reagent A              毫升

  处理液(Reagent B              毫升

产品说明书                 1

 

保存方式

 

保存在20℃冰箱里;有效保证6

 

用户自备

 

2毫升离心管:用于样品操作的容器

微型台式离心机:用于样品操作

 

操作步骤

 

一、 贴壁细胞处理

 

1. 准备1个细胞培养48孔板的待测细胞,细胞铺满率达70

(注意:可以使用载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和其它培养孔板,见注意事项6

2. 小心抽去细胞培养液

3. 小心沿着孔壁加入500微升  清理液(Reagent A1个细胞培养孔,覆盖细胞表面

4. 小心抽去  清理液(Reagent A

5. 小心沿着孔壁加入xx微升室温预热的  处理液(Reagent B1个细胞培养孔,覆盖细胞表面

6. 室温下孵育10分钟

7. 小心抽去  处理液(Reagent B

8. 小心沿着孔壁加入xx微升  清理液(Reagent A1个细胞培养孔,覆盖细胞表面

9. 小心抽去  清理液(Reagent A

10. 重复实验步骤89二次

11. 继续后续操作

 

二、悬浮细胞处理

 

1. 准备1106的待测细胞

2. 转移到2毫升离心管

3. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为2000g

4. 小心抽去细胞培养液

5. 小心加入xx微升  清理液(Reagent A,混匀细胞颗粒群

6. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为2000g

7. 小心抽去  清理液(Reagent A

8. 小心加入xx微升室温预热的  处理液(Reagent B,混匀细胞颗粒群

9. 室温下孵育10分钟

10. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为2000g

11. 小心抽去  处理液(Reagent B

12. 小心加入xx微升  清理液(Reagent A,混匀细胞颗粒群

13. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为2000g

14. 小心抽去  清理液(Reagent A

15. 重复实验步骤1214二次

16. 继续后续操作

 

注意事项

 

1. 本产品为20次操作

2. 本产品可以用于免疫染色的通透处理、受体实验、转运实验等

3. 操作时,须戴手套

4. 操作时,避免污染母液

5. 用户根据细胞特性,可以稀释  清理液(Reagent A

6. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整操作用量:

操作容器

  处理液(Reagent B操作用量

载玻片

100微升

载玻片培养皿

1毫升

35mm培养皿

1毫升

96孔培养板

100微升

48孔培养板

200微升

24孔培养板

500微升

12孔培养板

1毫升

6孔培养板

2毫升

25cm2细胞培养瓶

3毫升

 

7. 本公司提供系列质膜通透处理试剂产品

 

质量标准

 

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定通透稳定

 

 


扫一扫,关注微信
地址:上海市杨浦区武宁路269号 传真:86-021-55825868
©2024 铭修(上海)生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备16032190号-1